人血红素氧合酶2（HO-2）ELISA试剂盒子科ZIKER，人ELISA试剂盒

一、技术参数:

［保存条件］保质期2-8℃低温保存下，6个月的保质期。

［规格］96T/48T

［品牌］子科生物ZIKER

二、试剂盒包括试剂清单

名称	规格	数量	保存
包被平底微孔板	96孔	1可拆卸板	2-8℃密封冷藏
酶结合物	10毫升	1瓶	2-8℃冷藏
生物素	1ml	1瓶	2-8℃冷藏
标准品	1毫升	6瓶	2-8℃冷藏
显色剂A	6毫升	1瓶	2-8℃冷藏
显色剂B	6毫升	1瓶	2-8℃避光冷藏
终止液	6毫升	1瓶	2-8℃冷藏
浓缩洗涤液(100倍稀释)	10毫升	1瓶	2-8℃冷藏
使用说明书		1份

三、操作步骤

各试剂在使用前平衡至室温。

1. 加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。除空白孔外，余孔分别加标准溶液或待测样品100ul，注意不要有气泡，轻轻混匀，酶标板加上盖，37℃反应120分钟。

2. 弃去液体，甩干，不用洗涤。

3. 每孔加检测溶液A工作液 100ul，37℃,60分钟。洗板3次，350ul/每孔，甩干。

4. 每孔加检测溶液B工作液 100ul，37℃，60分钟，洗板5次，甩干。

5. 依序每孔加底物溶液90ul，37℃避光显色30分钟(此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色，后3-4孔梯度不明显)。

6. 依序每孔加终止溶液50ul，终止反应(此时兰色立转黄色)。用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。

四、实验操作注意事项

☆试剂准备：所有试剂都必须在使用前达到室温，使用后请立即按照说明书要求保存。实验操作中必须使用一次性吸头，避免交叉污染。

☆加样：加样时，要控制加样速度，避免第一孔与最后一孔之见的时间间隔过大，否则将会导致不同的预孵育时间，从而影响实验的准确性以及重复性；一般加样时间控制在10分钟内，如果样本数量过多，可使用多道移液器。

☆孵育：样品要在密闭的容器内进行孵育，严格按照说明书上规定的孵育时间和温度进行。

☆洗涤：洗涤过程中反应孔中的残留的洗涤液应在滤纸上充分拍干，同时要消除板底残留的液体和手指痕迹，避免影响最后的酶标仪读数。

☆反应时间的控制：加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化(比如，10分钟左右)，如果颜色较深，请提前加入终止液终止反应。

☆建议实验前预测样品含量，如样品浓度过高，应对样品进行稀释，计算结果时乘以相应的稀释倍数。

☆建议使用本试剂盒时先做预实验(即先做标准曲线，试用几个标本)，如果对本试剂盒有任何疑问，可和所购经销商联系，如果因运输过程导致试剂盒失效，可要求调换，但概不承担产品本身以外的任何损失。